体内药效

生物治疗疗效的表征和评价对于先导候选药物的选择至关重要。在过去10多年中，我们根据客户需求和适应症建立了细胞系、靶标和模型的有效性和实用性综合数据库，进一步建立了大量的药效模型，并提供专业咨询，根据项目需求提供客户优质解决方案。其高质量平台包括下列各类模型:

肿瘤模型

药明生物为临床前候选药物(PCCS)的药效表征研究提供多种肿瘤模型服务，包括:

• 同种异体移植模型

同种异体移植模型是将某品系动物来源的肿瘤细胞移植到该品系动物体内构建的肿瘤模型。药明生物可提供多种同种异体移植模型。

• 肿瘤细胞系异种移植模型

人源肿瘤细胞系异种移植(CDX)模型是获取药效数据和信息的一种经济高效的方法，尤其是对鼠没有交叉反应的抗体。这类模型加速先导候选药物进入IND申报和临床开发阶段。药明生物目前已开发并验证了大量的CDX模型。

• 人PBMC免疫重建小鼠模型

人PBMC免疫重建小鼠模型是将人外周血单核细胞(PBMC)移植入重度免疫缺陷动物构建的人免疫系统人源化小鼠模型。该模型帮助快速分析对鼠没有交叉反应的治疗性抗体在体内可能产生的免疫应答和效果。

药明生物目前已开发并验证了大量的人PBMC免疫重建小鼠模型。

• 靶点人源化小鼠模型(Knock-in(KI))

当需要研究抗体药物在人类免疫系统中的药效，或者需要研究的抗体跟小鼠没有交叉反应的时候，基因敲入小鼠是最合适的选择。药明生物能够提供各种单靶点、双靶点或者三靶点基因敲入的小鼠模型，用于抗体药物的评价。以下是验证过的各种基因敲入小鼠品系。

单靶点:

h-PD1,hPD-L1,hSIRPA,hCD47,hBTLA,hCD28hCTLA4,hGITR,hOX4hTGTTM3hAGh4-1BBhD27,

hCD3E,hCD94,hCD73,h4-1BB-LhB7-H3hCD3hNKG2AhSIGLEC1hLRRC33,hCD226.

HIL7R,B-hCXCL13,B-hRSPO1,B-hIL21RhIL13hCD4hOX4TNFR2hDCD2CTLA,hIL17,hTNFA,

HIL6,hIL33,hIL1B,hIL1B,hIL4,hIL4RA, etc.

双或三靶点:

Hh4-1BB/h4-1BB-LhCTLA4/h4-1BBCTLA4/hLAGCTLA4/h4CTA4/TM3hx0/h4-1BB,

HhPD-1/h4-1BBhPD-1/hBTLA,hPD-1/hCD4hPD-1/CTLA4hPD-1/hGIRhPD-1/hLAG,hPD-1/hOX40,

HhPD-1/hPD-L1,hCD47&hSIRPa,hPD-1/hTIGhPD-1hTIM3hPD-L1/h4-1BBhPD-L1/hCD4,hPD-L1/hCTLA4,

HhPD-L1/hLAG3,hPD-L1/hOX40,hPD-L1/hTIM3hPD-L1/hTIGIThPD-L1/hSIRPa/hCD47hPD-1/hPD-L1/h4-1BB

HhPD-1/hPD-L1/hCTLA4hPD-1/hPD-L1/hTIGIThPD-1/hPD-L1/hTIM3hPD1/hLAG3/hTIM3

HhPD-1/hPD-L1/hTNFR2,hPD-1/hPD-L1/hCD4hLTA/hTNFA/hLTB etc.

HhIL17A/hIL17F,hTNFA/hIL17A,B-hIL4/hIL4RA,B-hIL12A/hIL12BhIL6/hL6RhIL23A/hIL12B etc.

人源化CD34干细胞模型

人源化CD34干细胞模型平台正在建设中，该模型是将人的脐带血胎肝造血干细胞(CD34+)移植到辐照清髓的免疫缺陷小鼠的体内模型。该模型在小鼠体内较完整的重建了人源化免疫系统(包括T/B/髓系细胞等)，是肿瘤免疫治疗重要的药效评价体内模型。

主要功能:

• 生物发光和荧光标记分子的高灵敏度2D体内光学成像
• 用于生物发光和荧光成像的高灵敏度3D体内光学断层扫描
• 高通量成像(5只小鼠同时成像)
• 高分辨率成像(低至20微米)
• 覆盖430-850nm全波段的高效滤光片(28个)
• 实现基于多光谱扫描的高品质光谱分离成像
• 实现基于光谱分离成像而进行的背景去除及多探针成像
• 多模式成像及影像融合

应用举例-生物发光体内成像

VS Spectrum系统在原位、全身和转移模型中的药效评价方面有着独特优势。生物发光肿瘤模型提供了更贴近临床的器官特异性肿瘤微环境，相较于皮下肿瘤模型，能更好地反应临床的肿瘤情况。成像模型能更好地模拟原发性肿瘤病灶，体现肿瘤、基质和免疫成分之间的相互作用，更有效地获取肿瘤发展和自发性转移的结果。因此，生物发光模型为实时追踪疾病进展和研究药物抗肿瘤机制和疗效提供了理想的条件。

药明生物团队具有多年的成像模型经验，并利用IVISSpectrum系统建立了多种肿瘤类型的小动物活体成像模型。

缩略词:静脉(IntravenousIV);腹膜内(IntraperitonealIP);皮下(Subcutaneous,SC)。

可根据要求开发新模型。

自身免疫疾病模型

我们可以提供多种自身免疫疾病和代谢疾病动物模型，用于单抗、双抗、多抗和蛋白类药物的研究。具体动物模型如下:

• 实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)

  MOG35-55诱导的小鼠脑脊髓炎

  MBP诱导的脑脊髓炎

  PLP131-135诱导的脑脊髓炎

• 类风湿性关节炎(RA)模型

  胶原诱导的小鼠关节炎

  胶原诱导的大鼠关节炎

  佐剂诱导的大鼠关节炎

• 哮喘模型

  卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘

  屋尘螨(HDM)诱导的哮喘

• 系统性红斑狼疮(SLE)模型

  Pristane诱导的小鼠系统性红斑狼疮

  MRL/lpr系统性红斑狼疮

• 肠炎模型

  DSS诱导的肠炎

• 气囊模型

  卡拉胶诱导的小鼠气囊

  卡拉胶诱导的大鼠气囊

  rhiL-13诱导的小鼠气囊

• 特应性皮炎(AD)，银屑病，迟发型超敏反应(DTH)和瘙痒模型

  DNCB诱导的小鼠特应性皮炎

  DNCB诱导的大鼠特应性皮炎

  Oxazolone诱导的小鼠特应性皮炎

  MC903诱导的小鼠特应性皮炎

  咪喹莫特(IMQ)诱导的小鼠银屑病

  IL-23诱导的耳朵表皮增生

  KLH诱导的迟发型超敏反应

  Oxazolone诱导的迟发型超敏反应

  hiL-31诱导的瘙痒

• 纤维化和肝损伤模型

  博来霉素诱导的肺纤维化

  酸诱导的肾纤维化

  对乙酰氨基酚(APAP)诱导肝损伤

• T细胞依赖性抗体应答(TDAR)

  KLH诱导的T细胞依赖性抗体应答

• 嗜酸性粒细胞性胃肠炎(EG)

  卵清蛋白诱导的嗜酸性粒细胞性胃肠炎

代谢疾病模型

• 口服葡萄糖耐量试验(OGTT)
• 高脂饮食诱导肥胖模型(DIO)
• 蛋氨酸与胆碱缺乏高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝模型(NASH)
• mFc.hGDF15诱导的体重减轻

移植物抗宿主病(GvHD)模型

• 移植物抗宿主病(GvHD)模型

PK/PD和毒理学平台

药代动力学(PK)

药代动力学(PK)是研究药物吸收、分布、定位、代谢、生物转化和排泄的方法学。抗体PK研究的主要目标是确定具有理想的PK特征的候选药物，以增强疗效并降低毒性。先导候选药物的PK数据为IND申报和临床研究提供了关键参考。凭借丰富的经验和能力，我们建立了各类抗体PK检测的新技术和数据库。

能力

• 验证了各种ELISA方法的一致性和准确度
• 通过包被Fc、Fab1、ADC小分子负载、TCR、细胞因子、VHH和白蛋白的抗原，并联用FC、VHH或Fab2的检测抗体进行ELISA测定
• MSD平台可用于微量样本分析;具有高精度和高灵敏度
• LC-MS平台用于ADC分析
• 使用行业标准WinNonlin软件进行数据解读

动物种属

• 小鼠、大鼠、兔和猴
• 犬和猪(正在开发中)

PK参数

药效学(PD)和预毒理学

药物安全性评价是治疗性抗体开发的重要步骤。在该领域有多年经验的资深专家，为抗体安全性评估提供高质量的解决方案和服务。通过早期PD和毒理学试验结合药代动力学研究，为非临床研究、I期临床剂量选择、毒性反应和严重程度分析等提供了更多参考依据。在某些情况下，短期亚急性毒理试验(1-3个月)传达了药物安全性信息，并有助于确定创新候选药物是否可以向IND申报和早期临床试验。

离体检测平台

病理学检测

我们使用先进的仪器和设备提供全面、高品质的病理学服务。实验室配备石蜡包埋机，石蜡切片机、冷冻切片机、全自动组织脱水机、全自动免疫组化染色机、自动染色机、载玻片/包埋盒专用打号机、蜡块专用储存柜、载玻片专用储存柜、-80℃冰箱、通风橱以及光学显微镜、荧光显微镜和全片扫描仪。

• 组织学实验室能力

   

  石蜡包埋组织类型

  • 啮齿类动物样本(大/小鼠)
  • 灵长类动物样本
  • 人源性组织样本

   

  实验类型

  • 免疫组织化学染色(单染/双染)
  • 免疫荧光染色(单染/双染)
  • 酶组织化学染色(EHC)
  • 组织交叉反应实验(TCR，人源样本)
  • 抗体筛选实验(IVD试剂)
  • 凋亡细胞染色(TUNEL)
  • 细胞形态学快速染色(Diffquik)
  • 马松三色染色实验
  • 甲苯胺蓝染色
  • 苏木&伊红染色(H&E)
  • 过碘酸雪夫染色(PAS)
  • 油红染色
  • 固蓝染色(LFB)
  • 番红染色
  • 天狼猩红染色

   

  组织切片类型

  • 石蜡切片
  • 冰冻切片
  • 细胞涂片

   

  HALO病理分析软件

  • 定量阳性面积
  • 定量阳性细胞数量

流式分析平台

基于成熟的多色流式分析平台，药明生物可以提供各种exvivo实验服务，助力候选分子的筛选。

• 仪器

  GentleMACSOcto组织解离器:从各种动物组织中高效率地制备单细胞悬液。

  贝克曼库尔特cvtoFLEXLX流式细胞仪:配置5激光，19个颜色通道，适合高通量样本分析。

   

受体占有率(ReceptorOccupancy)试验

通过荧光标记抗体定量检测体内样本或细胞系中未占用受体的百分比从而计算出相应靶标上的受体占有率(RO)。

细胞因子测定

细胞因子是药效和潜在副作用的生物标志物，例如细胞因子释放综合征(CRS)。CRS是由疾病并发症、感染或抗体给药或生物治疗的其他不良反应引起的全身性炎症反应。因此，评价候选药物导致的CRS的研究是PCC筛选的关键部分。我们常规进行Th1、Th2、Th17和CRS细胞因子检测分析，具有高速和准确性。

可用的CRS检测分析平台:

• 定制细胞因子检测
• MSD 多重检测
• FACS CBA多重检测
• ELISA 检测

血生化(CHEM)

(CHEM)研究结果是反映尿液/肾脏、肝脏、胆囊、心血管、胰腺和胃肠道样本中碳水化合物、脂质和蛋白质代谢或含量的重要指标。这些指标为我们提供了关于PCC毒理学和生物学意义的数据。我们在CHEM检测方面积累了丰富的经验，并提供了满足客户需求的全面服务。

血常规(HEM)

血常规(HEM)检测作为疾病诊断和药物安全性评价的辅助手段。检测项目主要包括红细胞计数、白细胞计数、血小板计数和血红蛋白含量。通过分析血液检查数据，我们提供了初步安全性评价的数据，并提供了相应治疗的结论。

检测技术:

• 自动血液分析仪(BC-5000Vet)

HEM 检测类型

• 白细胞计数:WBC、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和NK细胞
• 红细胞:RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV、RDW-SD
• 血小板:PLT、MPV、PDW、PCT

凝血功能分析

凝血功能检测评价激活凝血级联反应后的血凝块形成情况。我们使用的分析仪支持多种检测方法分析，包括凝血终点、色原动力学分析、浊度免疫分析和自动血小板聚集，可提供多达60个可选择的参数。

检测仪器:

• 自动血液分析仪(BC-5000Vet)

检测能力:

• 运行模式:自动
• 分析模式:显色、免疫学
• 样本类型:全血
• 凝血终点分析:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原凝固时间(Fbg)、凝血酶时间(TT)、外源凝血因子活性检测(I、V、VII、X)、内源凝血因子活性检测(VII、IX、XI、XII)、蛋白S(PS)、蛋白C(PC)、狼疮抗凝物筛查(LA1)、狼疮抗凝物确诊(LA2)
• 色原动力学分析:抗凝血酶III(ATII)、a2-抗纤溶酶(a2Pl)、血纤溶酶原(Plg)、蛋白C(PC)、凝血因子XIII(FXIII)、肝素活性(Hep)、C1-抑制剂(C1)
• 浊度免疫分析:D-二聚体、纤维蛋白降解产物(FDP)
• 血小板凝集分析:ADP 胶原质(Col)和肾上腺素(Epi)

MSD-ECL检测系统

电化学发光免疫分析(ECLIA)是由电化学在电极表面启动的特异性化学发光反应。

MSD-ECL平台使用电化学发光标记的抗体结合物进行检测。标签通常使用SULFO-TAG标记。MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后，电化学作用激发SULFO-TAG标记发出电化学发光。利用配备Methodi-cal Mind软件的MSDS600MM系统，我们显著提升了PK、ADA和细胞因子平台的生物分析能力。

优点:

• 高灵敏度:更灵敏的检测下限和宽动态范围
• 高稳定性:单因素和多因素检测的结果一致
• 小样品体积:≤50μL
• 宽动态范围:4-5log
• 多重:高通量，对两种或多种分析物具有成本效益

关键应用程序:

• 生物标志物检测
• 生物药物代谢
• 免疫原性
• 高通量抗体亲和试验
• 信号通路磷酸化检测
• 具有384孔板的高通量

动物免疫平台

杂交瘤技术是单克隆抗体研发中的经典技术。我们拥有一流的设施和专家，为客户提供及时、高质量的服务。

• 我们的优势:

  经认证的设施(如AAALAC)

  高效、高质量的免疫策略和方案(独特的平台和自主开发的知识产权)

  提供人源化的单克隆抗体研发服务(OmniAb®和ATX-Gx™专利技术)

  针对DNA、多肽/蛋白质、细胞、脂质体、纳米颗粒或这些不同抗原的组合的免疫策略

• DNA递送
  单克隆抗体已广泛应用于肿瘤、炎症和自身免疫性疾病的治疗。然而，高昂的费用和剂量频率限制了患者获得这些治疗方式的机会。DNA递送是抗体疗法的一种高人力和成本效益的替代方案，递送频率较低，配方也更简单。纳米粒子递送系统克服了体内的生物屏障，延长了循环，提高了抗体的表达和可持续性。因此，DNA递送提供了一种可行的长期的治疗选择。在药明生物，我们拥有一支经验丰富的团队，可以进行体内和体外研究，以确定这一生物制药新领域的领先候选药物。

动物设施

药明生物配有饲养SPF级动物的先进设施，坐落于上海，面积2500多平米，近8000个大小鼠笼位。该设施于2021年获得了AAALAC认证和实验动物使用许可证，配备了泰尼百斯绿线IVC系统、地坑式脉动真空灭菌器、AII/BII型生物安全柜、高配的辐照仪和PE小动物活体成像系统。